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什麼是超高效液相色譜儀▩│◕▩?它該如何操作▩│◕▩?

釋出時間•··:2022-09-26        閱讀•··:204
  超高效液相色譜儀是基於高效液相色譜法的理論及原理↟·◕•,涵蓋了小顆粒填料•◕、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術↟·◕•,增加了分析的通量•◕、靈敏度及色譜峰容量✘✘☁◕。主要用於各種藥物及其製劑的分析測定↟·◕•,尤其是生物樣品•◕、中藥等複雜體系的成分的分離分析↟·◕•,可對物質進行定量定性分析✘✘☁◕。超高效液相色譜儀的速度•◕、靈敏度及分離度分別是傳統的高效液相色譜儀的9倍•◕、3倍及1.7倍↟·◕•,它縮短了分析時間↟·◕•,同時減少了溶劑用量降低了分析成本✘✘☁◕。  
 
  目前↟·◕•,超高效液相色譜儀是應用超高效液相色譜原理↟·◕•,主要用於分析高沸點不易揮發的•◕、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器裝置✘✘☁◕。可廣泛應用於生命科學•◕、食品科學•◕、藥物研究以及環境研究中✘✘☁◕。
 
  超高效液相色譜儀主要優點•··:
  1.單一波長標準靈敏度•◕、高靈敏度吸收譜✘✘☁◕。
  2.自動測定D2燈及W燈的開啟次數•◕、燈狀態•◕、燈點燃時間•◕、燈能量•◕、設定D2燈及W燈狀態✘✘☁◕。
  3.針對複雜混合物中各化合物在不同波長下的響應差異↟·◕•,用時間程式切換波長進行分析↟·◕•,與傳統紫外-可見檢測器相比↟·◕•,能夠極大程度提高所有化合物的測定靈敏度✘✘☁◕。
  4.超高效液相色譜儀採用進口光電二極體陣列作為光電檢測元件↟·◕•,無需任何機械部分調整•◕、選擇和改變波長↟·◕•,儀器使用過程中不會引起波長的改變↟·◕•,與常規的單色儀相比有良好的波長準確度和重現性↟·◕•,使得分析結果更加可靠✘✘☁◕。
 
  超高效液相色譜儀的操作步驟•··:
  1.過濾流動相↟·◕•,根據需要選擇不同的濾膜(0.45um)✘✘☁◕。
  2.對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘✘✘☁◕。
  3.開啟HPLC工作站↟·◕•,連線好流動相管道↟·◕•,連線檢測系統✘✘☁◕。
  4.進入HPLC控制介面主選單↟·◕•,點選manual↟·◕•,進入手動選單✘✘☁◕。
  5.有一段時間沒用↟·◕•,或者換了新的流動相↟·◕•,需要先沖洗泵和進樣閥✘✘☁◕。沖洗泵↟·◕•,直接在泵的出水口↟·◕•,用針頭抽取✘✘☁◕。沖洗進樣閥↟·◕•,需要在manual選單下↟·◕•,先點選purge↟·◕•,再點選start↟·◕•,沖洗時速度不要超過10ml/min✘✘☁◕。
  6.調節流量↟·◕•,初次使用新的流動相↟·◕•,可以先試一下壓力↟·◕•,流速越大↟·◕•,壓力越大↟·◕•,一般不要超過2000✘✘☁◕。點選injure↟·◕•,選用合適的流速↟·◕•,點選on↟·◕•,走基線↟·◕•,觀察基線的情況✘✘☁◕。
  7.設計走樣方法✘✘☁◕。點選file↟·◕•,選取select users and methods↟·◕•,可以選取現有的各種走樣方法✘✘☁◕。若需建立一個新的方法↟·◕•,點選new method✘✘☁◕。選取需要的配件↟·◕•,包括進樣閥↟·◕•,泵↟·◕•,檢測器等↟·◕•,根據需要而不同✘✘☁◕。選完後↟·◕•,點選protocol✘✘☁◕。一個完整的走樣方法需要包括•··:
  ①進樣前的穩流↟·◕•,一般2-5分鐘;
  ②基線歸零;
  ③進樣閥的loading-inject轉換;
  ④走樣時間↟·◕•,隨不同的樣品而不同✘✘☁◕。
  8.進樣和進樣後操作✘✘☁◕。選定走樣方法↟·◕•,點選start✘✘☁◕。進樣↟·◕•,所有的樣品均需過濾✘✘☁◕。方法走完後↟·◕•,點選postrun↟·◕•,可記錄資料和做標記等✘✘☁◕。全部樣品走完後↟·◕•,再用上面的方法走一段基線↟·◕•,洗掉剩餘物✘✘☁◕。
  9.關機時↟·◕•,先關計算機↟·◕•,再關液相色譜✘✘☁◕。

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