超高效液相色譜儀是基於高效液相色譜法的理論及原理₪↟│,涵蓋了小顆粒填料··╃、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術₪↟│,增加了分析的通量··╃、靈敏度及色譜峰容量✘◕。主要用於各種藥物及其製劑的分析測定₪↟│,尤其是生物樣品··╃、中藥等複雜體系的成分的分離分析₪↟│,可對物質進行定量定性分析✘◕。超高效液相色譜儀的速度··╃、靈敏度及分離度分別是傳統的高效液相色譜儀的9倍··╃、3倍及1.7倍₪↟│,它縮短了分析時間₪↟│,同時減少了溶劑用量降低了分析成本✘◕。
目前₪↟│,超高效液相色譜儀是應用超高效液相色譜原理₪↟│,主要用於分析高沸點不易揮發的··╃、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器裝置✘◕。可廣泛應用於生命科學··╃、食品科學··╃、藥物研究以及環境研究中✘◕。
超高效液相色譜儀主要優點▩••:
1.單一波長標準靈敏度··╃、高靈敏度吸收譜✘◕。
2.自動測定D2燈及W燈的開啟次數··╃、燈狀態··╃、燈點燃時間··╃、燈能量··╃、設定D2燈及W燈狀態✘◕。
3.針對複雜混合物中各化合物在不同波長下的響應差異₪↟│,用時間程式切換波長進行分析₪↟│,與傳統紫外-可見檢測器相比₪↟│,能夠極大程度提高所有化合物的測定靈敏度✘◕。
4.超高效液相色譜儀採用進口光電二極體陣列作為光電檢測元件₪↟│,無需任何機械部分調整··╃、選擇和改變波長₪↟│,儀器使用過程中不會引起波長的改變₪↟│,與常規的單色儀相比有良好的波長準確度和重現性₪↟│,使得分析結果更加可靠✘◕。
超高效液相色譜儀的操作步驟▩••:
1.過濾流動相₪↟│,根據需要選擇不同的濾膜(0.45um)✘◕。
2.對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘✘◕。
3.開啟HPLC工作站₪↟│,連線好流動相管道₪↟│,連線檢測系統✘◕。
4.進入HPLC控制介面主選單₪↟│,點選manual₪↟│,進入手動選單✘◕。
5.有一段時間沒用₪↟│,或者換了新的流動相₪↟│,需要先沖洗泵和進樣閥✘◕。沖洗泵₪↟│,直接在泵的出水口₪↟│,用針頭抽取✘◕。沖洗進樣閥₪↟│,需要在manual選單下₪↟│,先點選purge₪↟│,再點選start₪↟│,沖洗時速度不要超過10ml/min✘◕。
6.調節流量₪↟│,初次使用新的流動相₪↟│,可以先試一下壓力₪↟│,流速越大₪↟│,壓力越大₪↟│,一般不要超過2000✘◕。點選injure₪↟│,選用合適的流速₪↟│,點選on₪↟│,走基線₪↟│,觀察基線的情況✘◕。
7.設計走樣方法✘◕。點選file₪↟│,選取select users and methods₪↟│,可以選取現有的各種走樣方法✘◕。若需建立一個新的方法₪↟│,點選new method✘◕。選取需要的配件₪↟│,包括進樣閥₪↟│,泵₪↟│,檢測器等₪↟│,根據需要而不同✘◕。選完後₪↟│,點選protocol✘◕。一個完整的走樣方法需要包括▩••:
①進樣前的穩流₪↟│,一般2-5分鐘;
②基線歸零;
③進樣閥的loading-inject轉換;
④走樣時間₪↟│,隨不同的樣品而不同✘◕。
8.進樣和進樣後操作✘◕。選定走樣方法₪↟│,點選start✘◕。進樣₪↟│,所有的樣品均需過濾✘◕。方法走完後₪↟│,點選postrun₪↟│,可記錄資料和做標記等✘◕。全部樣品走完後₪↟│,再用上面的方法走一段基線₪↟│,洗掉剩餘物✘◕。
9.關機時₪↟│,先關計算機₪↟│,再關液相色譜✘◕。