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C18色譜柱從pH指數上面如何進行選擇

釋出時間╃•☁·▩:2022-09-14        閱讀╃•☁·▩:128
C18色譜柱因鍵合方式的不同↟₪·▩₪、粒徑的不同↟₪·▩₪、長度的不同•╃☁▩,內徑的差異等多方面因素•╃☁▩,呈現出不同選擇性↟▩✘·。這樣•╃☁▩,在市場上就出現了數百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱↟▩✘·。

對於傳統的C18色譜柱•╃☁▩,pH值使用範圍通常為2~7•╃☁▩,因為pH值高於8時C18固定相會受到限制↟▩✘·。由於殘餘矽羥基的存在•╃☁▩,易對鹼性化合物造成不可逆吸附•╃☁▩,造成峰拖尾•╃☁▩,影響分離與分析↟▩✘·。pH值太低則會使鍵合的烷基脫落•╃☁▩,而且對成分的分離達不到要求↟▩✘·。

1↟₪·▩₪、酸性條件下C18的選擇

為了改善C18色譜柱在低pH值時的穩定性•╃☁▩,有人提出了空間位阻方法↟▩✘·。

空間位阻作用是指連線較大基團•╃☁▩,立體阻礙溶質基團進攻矽醇基•╃☁▩,使矽氧烷能夠再生•╃☁▩,提高了化學鍵合固定相抗水解的能力↟▩✘·。

還有人制備了側鏈中含有異丙基或異丁基的C18化學鍵合固定相↟▩✘·。該固定相由於引入了較大的側鏈基團•╃☁▩,立體阻礙了殘留矽醇基與溶質之間的相互作用•╃☁▩,在低pH值條件下能夠保持穩定•╃☁▩,這種化學鍵合固定相更適合酸性物質的分離↟▩✘·。

Zorbax Stable Bond C18色譜柱就使用了空間位阻技術•╃☁▩,其使用單官能團矽烷•╃☁▩,具有較大的二異丁基(SB-C18)側鏈基團•╃☁▩,空間位阻關鍵的矽氧烷鍵合到矽膠表面•╃☁▩,以避免在低pH值條件下水解破壞•╃☁▩,在酸性流動相條件下提供良好的穩定性和重現性↟▩✘·。因此•╃☁▩,Stable Bond色譜柱成為低pH值方法開發的很好的選擇↟▩✘·。在方法開發初期•╃☁▩,若選定流動相為酸性•╃☁▩,可將此類色譜柱作為很好的選擇↟▩✘·。

2↟₪·▩₪、鹼性條件下C18的選擇

製造快速分離鹼性化合物的化學鍵合相一直是研究熱點↟▩✘·。

雙齒鍵合固定相的每個矽烷化分子中含有兩個矽原子•╃☁▩,兩個矽原子之間以-O-或-CH2-CH2等基團連線•╃☁▩,每個矽原子含有1個C18官能團↟▩✘·。它的環狀結構無論在低pH值條件下•╃☁▩,還是高pH值條件下均顯示了較高的穩定性和滿意的柱效↟▩✘·。

與傳統的單齒化學鍵合相相比•╃☁▩,這種化學鍵合固定相突出的優點是在低↟₪·▩₪、中↟₪·▩₪、高pH值時都有很好的穩定性↟▩✘·。使用C18雙齒化學鍵合固定相的商品柱有Zorbax Extend-C18色譜柱•╃☁▩,其耐受pH值達11.5•╃☁▩,特別適合在高pH值的流動相條件下對強鹼性化合物進行有效的色譜分離↟▩✘·。
 

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