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影響色譜柱效能的因素有哪些

釋出時間·↟:2022-08-15        閱讀·↟:499
  色譜柱由柱管₪✘▩、壓帽₪✘▩、卡套(密封環)₪✘▩、篩板(濾片)₪✘▩、接頭₪✘▩、螺絲等組成▩✘。
  只有瞭解影響色譜柱效能的因素✘◕╃✘,才能結合目標分析物的性質₪✘▩、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱▩✘。
  (1) 矽膠純度
  矽膠純度和殘留金屬離子濃度✘◕╃✘,矽膠的雜質會影響化合物的峰形✘◕╃✘,矽膠表面的金屬含量高會影響鹼性化合物的峰形✘◕╃✘,易發生拖尾▩✘。
  (2) 色譜柱尺寸
  填料床的長度和內徑✘◕╃✘,增加色譜柱長度✘◕╃✘,可以在一定程度上提高柱效✘◕╃✘,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑✘◕╃✘,提高載樣量✘◕╃✘,但也會增加橫向擴散✘◕╃✘,同樣會導致峰展寬▩✘。窄柱徑可以節約溶劑✘◕╃✘,可減少橫向擴散✘◕╃✘,但壓力較大✘◕╃✘,對系統要求較高▩✘。
  (3) 顆粒形狀及粒徑
  球形顆粒柱效高₪✘▩、重現性好₪✘▩、柱床結構均勻✘◕╃✘,不規則形柱床結構不均勻₪✘▩、流動相線速度不均勻✘◕╃✘,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑✘◕╃✘,粒徑越小✘◕╃✘,柱效越高✘◕╃✘,柱壓也越高▩✘。粒徑分佈越廣則柱效越低✘◕╃✘,壓力越大▩✘。
  (4) 顆粒表面積
  顆粒外表面和內部孔表面的總和✘◕╃✘,以m2/g表示✘◕╃✘,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力✘◕╃✘,更大的柱容量和分離度▩✘。而低表面積能更快達到平衡狀態✘◕╃✘,更適合梯度洗脫程式▩✘。
  (5) 孔徑
  顆粒的孔或腔的平均尺寸✘◕╃✘,範圍是80~300Å✘◕╃✘,大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質在填料表面的滯留時間✘◕╃✘,改善分離✘◕╃✘,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子▩✘。
  (6) 鍵合型別及鍵合
  鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合✘◕╃✘,這種鍵合方式可以提高傳質速率✘◕╃✘,縮短柱平衡時間✘◕╃✘,;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連✘◕╃✘,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩定性✘◕╃✘,增載入樣量▩✘。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為▩✘。
  (7) 碳覆蓋率
 碳覆蓋率可以提高解析度和重現性✘◕╃✘,但分析時間長▩✘。
  (8) 封端
  矽膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留矽羥基✘◕╃✘,如圖封端可以減輕待測組分與矽膠表面殘留的酸性矽羥基反應✘◕╃✘,改善保留和峰行✘◕╃✘,這對於鹼性化合物尤其重要▩✘。而不同的封端技術也會直接影響色譜柱的效能▩✘。

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