液相色譜是應用最多的色譜分析方法↟•↟↟│，液相色譜系統由流動相儲液體瓶☁│◕│₪、輸液泵☁│◕│₪、進樣器☁│◕│₪、色譜柱☁│◕│₪、檢測器和記錄器組成↟•↟↟│，其整體組成類似於氣相色譜↟•↟↟│，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整▩▩✘↟☁。HPLC的輸液泵要求輸液量恆定平穩；進樣系統要求進樣便利切換嚴密；由於液體流動相粘度遠遠高於氣體↟•↟↟│，為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗↟•↟↟│，長度也遠小於氣相色譜柱▩▩✘↟☁。HPLC應用非常廣泛↟•↟↟│，幾乎遍及定量定性分析的各個領域▩▩✘↟☁。
使用液相色譜時↟•↟↟│，液體待檢測物被注入色譜柱↟•↟↟│，透過壓力在固定相中移動↟•↟↟│，由於被測物種不同物質與固定相的相互作用不同↟•↟↟│，不同的物質順序離開色譜柱↟•↟↟│，透過檢測器得到不同的峰訊號↟•↟↟│，最後透過分析比對這些訊號來判斷待測物所含有的物質▩▩✘↟☁。液相色譜作為一種重要的分析方法↟•↟↟│，廣泛的應用於化學和生化分析中▩▩✘↟☁。液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別↟•↟↟│，它的特點是採用了高壓輸液泵☁│◕│₪、高靈敏度檢測器和微粒固定相↟•↟↟│，適於分析高沸點不易揮發☁│◕│₪、分子量大☁│◕│₪、不同極性的有機化合物▩▩✘↟☁。
液相色譜系統常見故障及應對措施•✘☁：
1☁│◕│₪、柱壓高•✘☁：
原因•✘☁：緩衝液鹽分沉積於柱內；或者是樣品汙染沉積▩▩✘↟☁。
措施•✘☁：如果是緩衝液鹽分沉積於柱內↟•↟↟│，則用40～50℃的純水低速正向沖洗柱子↟•↟↟│，逐漸提高流速沖洗↟•↟↟│，柱壓大幅度下降後再用常溫純水清洗↟•↟↟│，最後用純甲醇沖洗柱子30分鐘▩▩✘↟☁。
如果是樣品汙染沉積導致↟•↟↟│，則用純水反向沖洗柱子↟•↟↟│，再用甲醇沖洗↟•↟↟│，隨後用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子↟•↟↟│，再用甲醇沖洗↟•↟↟│，然後用純水沖洗↟•↟↟│，最後用甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘▩▩✘↟☁。
2☁│◕│₪、氣泡溢位•✘☁：
原因•✘☁：主要是由於過濾器長期沉浸於乙酸銨等緩衝液內↟•↟↟│，內部黴菌繁殖形成菌團阻塞了過濾器導致▩▩✘↟☁。
措施•✘☁：將過濾器浸泡於5%硝酸溶液中↟•↟↟│，利用超聲清洗既分鐘▩▩✘↟☁。或者將過濾器浸泡於5%硝酸溶液中12～36小時↟•↟↟│，再用純水清洗↟•↟↟│，開啟purge鍵清洗脫氣↟•↟↟│，直到沒有氣泡冒出▩▩✘↟☁。開啟洩壓閥↟•↟↟│，開啟泵↟•↟↟│，純水沖洗過濾器1小時左右▩▩✘↟☁。
3☁│◕│₪、無壓力指示↟•↟↟│，也無液體流過•✘☁：
原因•✘☁：泵密封墊圈磨損；或大量氣泡進入泵體▩▩✘↟☁。
措施•✘☁：更換密封墊圈↟•↟↟│，或用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣▩▩✘↟☁。
4☁│◕│₪、壓力波動大↟•↟↟│，流量不穩定•✘☁：
原因•✘☁：系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物▩▩✘↟☁。
措施•✘☁：觀察流動相的量↟•↟↟│，動相要充分脫氣▩▩✘↟☁。如果是單向閥和閥座不能密封↟•↟↟│，則拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗▩▩✘↟☁。
5☁│◕│₪、峰面積重複性不佳•✘☁：
原因•✘☁：進樣閥漏液；或加樣針不到位↟•↟↟│，或者是液量不足▩▩✘↟☁。
6☁│◕│₪、出峰不佳↟•↟↟│，峰分叉•✘☁：
原因•✘☁：色譜柱被汙染↟•↟↟│，或者柱頭填料塌陷▩▩✘↟☁。
措施•✘☁：色譜柱被汙染則需清洗色譜柱▩▩✘↟☁。如果柱頭填料塌陷或硬結↟•↟↟│，則去除硬結部分↟•↟↟│，衝新裝入新填料▩▩✘↟☁。反覆滴甲醇↟•↟↟│，壓緊不鏽鋼杆↟•↟↟│，直至填滿▩▩✘↟☁。柱頭用甲醇沖洗乾淨▩▩✘↟☁。
