高效液相色譜儀的應用原理

高效液相色譜儀的應用原理

高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理▩↟▩，主要用於分析高沸點不易揮發的↟₪、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器裝置↟↟│。它由儲液器↟₪、泵↟₪、進樣器↟₪、色譜柱↟₪、檢測器↟₪、記錄儀等幾部分組成↟↟│。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統▩↟▩，樣品溶液經進樣器進入流動相▩↟▩，被流動相載入色譜柱(固定相) 內▩↟▩，由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數▩↟▩，在兩相中做相對運動時▩↟▩，經過反覆多次的吸附- 解吸的分配過程▩↟▩，各組分在移動速度上產生較大的差別▩↟▩，被分離成單個組分依次從柱內流出▩↟▩，透過檢測器時▩↟▩，樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀▩↟▩，資料以圖譜形式打印出來↟↟│。HPLC廣泛應用於生命科學↟₪、食品科學↟₪、藥物研究以及環境研究中↟↟│。

高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液▩↟▩，不受樣品揮發性的限制▩↟▩，流動相可選擇的範圍寬▩↟▩，固定相的種類繁多▩↟▩，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的↟₪、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質↟↟│。

　　與試樣預處理技術相配合▩↟▩，HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度▩↟▩，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能▩↟▩，能夠分離複雜相體中的微量成分↟↟│。隨著固定相的發展▩↟▩，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離↟↟│。

　　HPLC成為解決生化分析問題有前途的方法↟↟│。由於HPLC具有高解析度↟₪、高靈敏度↟₪、速度快↟₪、色譜柱可反覆利用▩↟▩，流出組分易收集等優點▩↟▩，因而被廣泛應用到生物化學↟₪、食品分析↟₪、醫藥研究↟₪、環境分析↟₪、無機分析等各種領域↟↟│。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向↟↟│。

　　液相色譜- 質譜連用技術受到普遍重視▩↟▩，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜連用也發展很快▩↟▩，如在環境汙染分析測定水中的烴類▩↟▩，海水中的不揮發烴類▩↟▩，使環境汙染分析得到新的發展↟↟│。