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以下這些資料可以幫您更好的使用高效液相色譜柱

釋出時間╃│•✘:2020-07-13        閱讀╃│•✘:949
  高效液相色譜柱用於快速分離混合極性樣品╃▩☁││,與C8或C18柱相比╃▩☁││,疏水性較小╃▩☁││,通常可使用水相成分高的洗脫液·◕☁。對非極性化合物表現了更短的保留時間╃▩☁││,對極性化合物幾乎沒有明顯影響·◕☁。高效液相色譜柱是以液體作為流動相的一種色譜分析法╃▩☁││,它亦是根據不同組分在流動相和固定相之間的分配係數的差異來對混合物進行分離的·◕☁。氣相色譜中評價色譜柱柱效的方法及計算理論塔板數的公式同樣適合於高效液相色譜·◕☁。

  效能優點╃│•✘:
  1₪✘、分離生物分子的理想選擇*封端;
  2₪✘、高覆蓋率╃▩☁││,*鍵合╃▩☁││,球型矽膠載體╃▩☁││,*封端中等的疏水性;
  3₪✘、固定相的疏水性較小;分離特性不同於ODS·◕☁。
 
  實驗條件╃│•✘:
  1₪✘、色譜柱1長15cm╃▩☁││,內徑4.6mm╃▩☁││,裝填10um的C-18烷基鍵合固定相;
  2₪✘、色譜柱2長15cm╃▩☁││,內徑4.6mm╃▩☁││,裝填5um的C-18烷基鍵合固定相;
  3₪✘、流動相甲醇╃│•✘:水(85:15)╃▩☁││, 流量0.8ml/min;
  4₪✘、紫外光度檢測器波長 254nm╃▩☁││,靈敏度0.08;
  5₪✘、進樣量5μ1·◕☁。
 
  高效液相色譜柱的實驗步驟╃│•✘:
  1₪✘、根據實驗條件和實驗錄影指導╃▩☁││,按KLC321儀器操作步驟將儀器調節至進樣狀態╃▩☁││,待儀器流路及電路系統達到平衡╃▩☁││,色譜工作站之“取樣系統”基線平直時╃▩☁││,即可進樣;
  2₪✘、吸取5μ1苯₪✘、萘₪✘、聯苯的甲醇溶液進樣╃▩☁││,並用色譜工作站記錄色譜資料╃▩☁││,同時記錄色譜資料檔名;
  3₪✘、用色譜工作站之“資料處理”系統處理資料檔案並記錄所需資料;
  4₪✘、在儀器上測定色譜柱2的塔板數╃▩☁││,列印色譜圖並比較色譜柱柱效差異·◕☁。
 
  資料記錄及處理╃│•✘:
  1₪✘、記錄實驗條件·◕☁。
  a₪✘、色譜柱與固定相;
  b₪✘、流動相及其流量₪✘、柱前壓;
  c₪✘、檢測器及其靈敏度;
  d₪✘、進樣量;
  2₪✘、記錄色譜峰的保留時間tR和相應色譜峰的半峰寬Y12·◕☁。
  3₪✘、分別計算苯₪✘、萘₪✘、聯苯在該色譜柱上的理論塔板數n和理論塔板高度·◕☁。

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