高效液相色譜分析柱的分離效果取決於所選擇的固定相••，以及色譜分析柱的製備和操作條件││◕。
色譜是一種分離分析手段••，分離是核心••，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟││◕。對色譜柱的要求是柱效高•╃◕▩·、選擇性好••，分析速度快等││◕。市售的用於HPLC的各種微粒填料如多孔矽膠以及以矽膠為基質的鍵合相•╃◕▩·、氧化鋁•╃◕▩·、有機聚合物微球•╃◕▩·、多孔碳等••，其粒度一般為3,5,7,10μm等••，柱效理論值可達5~16萬/米││◕。對於一般的分析只需5000塔板數的柱效；對於同系物分析••，只要500即可；對於較難分離物質對則可採用高達2萬的柱子••，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足複雜混合物分析的需要││◕。
色譜分析柱柱材料╃╃│：
該柱管常採用內壁經過精密加工拋光的不鏽鋼管••，以獲得高柱效││◕。不鏽鋼管耐溶劑•╃◕▩·、水和緩衝溶液的腐蝕••，使用前色譜柱管先用Trichloromethane•╃◕▩·、甲醇和水依次清洗••，再用50%的hno3對柱內壁作鈍化處理││◕。鈍化時使hno3在色譜柱管中至少滯留10min••，以在柱內壁形成鈍化的氧化物塗層││◕。
柱管也採用氟塑膠•╃◕▩·、玻璃和玻璃襯裡材料••，主要是從抗腐蝕和易加工方面考慮││◕。
保證高效液相色譜分析柱的效能和壽命╃╃│：
1•╃◕▩·、認證閱讀使用說明書
2•╃◕▩·、使用填充良好的色譜分析柱││◕。
3•╃◕▩·、使用保護柱及線上過濾器││◕。
4•╃◕▩·、經常以強溶劑沖洗色譜分析柱││◕。
5•╃◕▩·、色譜分析柱使用溫度*小於400C││◕。
6•╃◕▩·、儘量減少壓力波動••，避免機械及熱衝擊││◕。
7•╃◕▩·、在水流動相與緩衝濃液中加200ppm的疊氮鈉││◕。
8•╃◕▩·、充分過濾樣品及流動相••，儘量避免雜質微粒與保強留分成││◕。
9•╃◕▩·、過夜或儲存時••，沖洗掉鹽和緩衝液••，用純有機溶劑流動相儲存││◕。
10•╃◕▩·、矽膠基質的的色譜分析柱••，應保持流動相的PH值範圍在3.0~8.0││◕。
11•╃◕▩·、流動相中含有緩衝溶液••，應注意應95∶5的水及有機溶劑過渡••，有機溶劑不能低於5%││◕。
