HPLC液相色譜儀是應用高效液相色譜原理✘☁☁☁✘,主要用於分析高沸點不易揮發的✘╃、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器裝置✘↟。它由儲液器✘╃、泵✘╃、進樣器✘╃、色譜柱✘╃、檢測器✘╃、記錄儀等幾部分組成✘↟。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統✘☁☁☁✘,樣品溶液經進樣器進入流動相✘☁☁☁✘,被流動相載入色譜柱(固定相) 內✘☁☁☁✘,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數✘☁☁☁✘,在兩相中做相對運動時✘☁☁☁✘,經過反覆多次的吸附- 解吸的分配過程✘☁☁☁✘,各組分在移動速度上產生較大的差別✘☁☁☁✘,被分離成單個組分依次從柱內流出✘☁☁☁✘,透過檢測器時✘☁☁☁✘,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀✘☁☁☁✘,資料以圖譜形式打印出來✘↟。HPLC廣泛應用於生命科學✘╃、食品科學✘╃、藥物研究以及環境研究中✘↟。

HPLC液相色譜儀的主要操作步驟·▩•╃│:
1✘╃、過濾流動相✘☁☁☁✘,根據需要選擇不同的濾膜✘↟。
2✘╃、對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘✘↟。
3✘╃、開啟HPLC工作站(包括計算機軟體和色譜儀)✘☁☁☁✘,連線好流動相管道✘☁☁☁✘,連線檢測系統✘↟。
4✘╃、進入HPLC控制介面主選單✘☁☁☁✘,點選manual✘☁☁☁✘,進入手動選單✘↟。
5✘╃、有一段時間沒用✘☁☁☁✘,或者換了新的流動相✘☁☁☁✘,需要先沖洗泵和進樣閥✘↟。沖洗泵✘☁☁☁✘,直接在泵的出水口✘☁☁☁✘,用針頭抽取✘↟。沖洗進樣閥✘☁☁☁✘,需要在manual選單下✘☁☁☁✘,先點選purge✘☁☁☁✘,再點選start✘☁☁☁✘,沖洗時速度不要超過10ml/min✘↟。
6✘╃、調節流量✘☁☁☁✘,初次使用新的流動相✘☁☁☁✘,可以先試一下壓力✘☁☁☁✘,流速越大✘☁☁☁✘,壓力越大✘☁☁☁✘,一般不要超過2000✘↟。點選injure✘☁☁☁✘,選用合適的流速✘☁☁☁✘,點選on✘☁☁☁✘,走基線✘☁☁☁✘,觀察基線的情況✘↟。
7✘╃、設計走樣方法✘↟。點選file✘☁☁☁✘,選取selectusersandmethods✘☁☁☁✘,可以選取現有的各種走樣方法✘↟。若需建立一個新的方法✘☁☁☁✘,點選newmethod✘↟。選取需要的配件✘☁☁☁✘,包括進樣閥✘☁☁☁✘,泵✘☁☁☁✘,檢測器等✘☁☁☁✘,根據需要而不同✘↟。選完後✘☁☁☁✘,點選protocol✘↟。
一個完整的走樣方法需要包括·▩•╃│:
a✘╃、進樣前的穩流✘☁☁☁✘,一般2-5分鐘;
b✘╃、基線歸零;
c✘╃、進樣閥的loading-inject轉換;
d✘╃、走樣時間✘☁☁☁✘,隨不同的樣品而不同✘↟。
8✘╃、進樣和進樣後操作✘↟。選定走樣方法✘☁☁☁✘,點選start✘↟。進樣✘☁☁☁✘,所有的樣品均需過濾✘↟。方法走完後✘☁☁☁✘,點選postrun✘☁☁☁✘,可記錄資料和做標記等✘↟。全部樣品走完後✘☁☁☁✘,再用上面的方法走一段基線✘☁☁☁✘,洗掉剩餘物✘↟。
9✘╃、關機時✘☁☁☁✘,先關計算機✘☁☁☁✘,再關液相色譜✘↟。
10✘╃、填寫登記本✘☁☁☁✘,由負責人簽字✘↟。